Содержание NK и NKT- лимфоцитов и их коагрегатов с тромбоцитами в периферической крови здоровых детей разного возраста

Цель исследования. Определить содержание натуральных киллеров (NK-лимфоцитов) и натуральных киллеров Т-лимфоцитов (NKT-лимфоцитов) и их коагрегатов с тромбоцитами PNKcelC (Platelet NK-cells Co-aggregates), PNKTcelC (Platelet NKT-cells Co-aggregates) в периферической крови здоровых детей разного возраста при помощи проточной цитофлуориметрии.

Материалы и методы. Проведено исследование цельной крови 111 здоровых детей в возрасте от 7 месяцев до 14 лет. Периферическую кровь детей забирали в вакуумные пробирки с ЭДТА. Для выявления основных популяций и субпопуляций лимфоцитов, тромбоцитарно-лимфоцитарных коагрегатов применялись моноклональные антитела, конъюгированные с различными флуорохромами. Определение исследуемых параметров проводили с использованием метода проточной цитофлуориметрии. Для сравнения всех 6 исследуемых групп по одному количественному признаку применялся критерий Краскела–Уоллиса (H). При наличии статистически значимых различий проводилось попарное сравнение с помощью критерия Манна-Уитни (U) с поправкой Бонферрони.

Результаты. Относительное содержание NK-клеток в периферической крови было минимальным у детей первого года жизни и постепенно возрастало к 12 годам. Абсолютное содержание NK-лимфоцитов оставалось неизменным во всех возрастных группах. Абсолютное и относительное содержание NKТ-клеток постепенно повышалось с возрастом, достигая максимальных значений у детей 12 лет. Впервые установлено, что абсолютное содержание PNKTcelC было минимальным у детей в возрасте 1-2 года и максимальным у детей в возрасте от 2 до 6 лет. При этом абсолютное содержание PNKcelC оставалось неизменным во всех возрастных группах. Однако относительное содержание PNKcelC находилось на стабильно низком уровне практически во всех обследуемых возрастных группах, кроме детей в возрасте от 1 года до 2 лет, у которых наблюдалось значительное увеличение этого показателя.

Заключение. Содержание NK и NKT-клеток, а также PNKcelC, PNKTcelC зависит от возраста детей.

1. Zahran, A.M., Saad, K., Elsayh, K.I. et al. Upregulation of Cytotoxic T-cells in pediatric patients with Gaucher disease. SciRep. 2022. 12. 4977. https://doi.org/10.1038/s41598-022-08843-4

2. Freud, AG; Mundy-Bosse, B.L.; Yu, J.; Caligiuri, M.A. Broad spectrum of human natural killer cell diversity. Immunity. 2017. 47. 820–833.

3. Chen, Yu.; Lu, D.; Churov, A.; Fu, R. Progress in research on NK cell receptors and their signaling pathways. Mediat. Inflammation. 2020. 6437057.

4. Schwane, W.; Hyun-Tran, V.H.; Vollmers, S.; Yakup, V.M.; Sauter, J.; Schmidt, A.H.; Payne, S.; Altfeld, M.; Richert, L.; Koerner, K. Distinguishing features in the receptor repertoireDistinguish between CD56bright and CD56dim natural killer cells. Front. Immunol. 2020. 11. 568927.

5. Zahran AM, Abdel-Rahim MH, Elsayh KI, Hassanien MM, Mahran SA, Hetta HF. Natural Killer and Natural Killer T Cells in Juvenile Systemic Lupus Erythematosus: Relation to Disease Activity and Progression. Arch Immunol Ther Exp (Warsz). 2019. 67(3). 161-169. doi: 10.1007/s00005-019-00537-6.

6. Zhou, J.; Tian, Z.; Peng, H. Tissue-resident NK cells and other innate lymphoid cells. Add. Immunol. 2020. 145. 37–53.

7. Hashemi, E.; Malarkannan, S. Tissue-resident NK cells: development, maturation, and clinical relevance. Cancers. 2020. 12. 1553.

8. Mezger M., Nording H., Sauter R. et al.Platelets and immune responses during thromboinÀammation. Front Immunol. 2019. 10. 1731. DOI: https://www.doi.org/10.3389/¿mmu.2019.01731.

9. Lukasik Z.M., Makowski M., Makowska J.S. From blood coagulation to innate and adaptive immunity: the role of platelets in the physiology and pathology of autoimmune disorders. Rheumatol. Int. 2018. 38 (6). 959–74. DOI: https://www.doi.org/10.1007/s00296-018-4001-9.

10. Кузник Б.И., Батожаргалова Б.Ц., Витковский Ю.А. Состояние иммунитета и лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии у детей с хроническим деформирующим бронхитом. Медицинская иммунология. 2008. 10 (6). 583–588.

11. Долина А.Б., Кузник Б.И., Розенберг В.Я., Вишнякова Т.М., Витковский Ю.А. Влияние тималина на состояние иммунитета и лимфоцитарно-тромбоцитарную адгезию у детей с вторичным инфекционным эндокардитом. Медицинская иммунология. 2010. 12(4-5). 381- 386. https://doi.org/10.15789/1563-0625-2010-4-5-381-386.

12. Витковский Ю.А., Кузник Б.И., Солпов А.В. Феномен лимфоцитарно-тромбоцитарного розеткообразования. Иммунология. 1999. (4). 35–7.

13. Витковский Ю.А., Кузник Б.И., Солпов А.В. Патогенетическое значение лимфоцитарно- тромбоцитарной адгезии. Медицинская иммунология. 2006. 8(5–6). 745–3.

14. Solpov A., Shenkman B., Vitkovsky Y., Brill G., Koltakov A., Farzam N., Varon D., Bank I., Savion N. Platelets enhance CD4+ lymphocyte adhesion to extracellular matrix under fl ow conditions: role of platelet aggregation, integrins, and non-integrin receptors. Thromb. Haemost. 2006. 95 (5). 815–21.

15. Кузник Б.И., ВитковскийЮ.А., Солпов А.В. Адгезивные молекулы и лейкоцитарно- тромбоцитарные взаимодействия. Вестник гематологии. 2006. 2 (2). 42–55.

16. Shenkman B., Brill G., Solpov A.,Vitkovsky Y., Kuznik B., Koltakov A., Kotev-Emeth S., Savion N., Bank I. CD4+ lymphocytes require platelets for adhesion to immobilized fi bronectin in fl ow: role of beta (1) (CD29)-, beta(2) (CD18)-related integrin’s and non-integrin receptors. Cell. Immunol. 2006. 242 (1). 52–9. DOI: https://doi.org/10.1016/j.cellimm.2006.09.005.

17. Солпова О.А., Аветисян М.А., Терешков П.П., Солпов А.В., Витковский Ю.А. Участие TCRαβ- и γδ-T-лимфоцитов, P-селектинав формировании клеточно-тромбоцитарных коагрегатов. Забайкальский медицинский вестник. 2016. 2. 71–9.

18. Хайдуков С.В., Байдун Л.А., Зурочка А.В., Тотолян А.А. Стандартизованная технология «исследование субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови с применением проточных цитофлюориметров-анализаторов» (ПРОЕКТ). Медицинская иммунология. 2012. 14 (3). 255–68.

19. Ding Y., Zhou L., Xia Yu., Song H., Yang J., Zhao X. Reference values for peripheral blood lymphocyte subsets of healthy children in China. Journal of allergologyand clinical immunology. 2018. DOI: https://doi.org/10.1016/j.jaci.2018.04.022

20. Lerkvaleekul B., Apiwattanakul N., Klinmalai C., HongengS.,Vilaiyuk S. Age-related changes in lymphocyte subpopulations in healthy Thai children. J. Clin. Lab. Anal. 2020. 34(5). e23156. DOI: https://www.doi.org/10.1002/jcla.23156.

21. Valiathan R., Ashman M., Asthana D. Effects of Ageing on the Immune System: Infants to Elderly. Scand J Immunol. 2016. 83 (4). 255–66. DOI:https://doi.org/10.1111/sji.12413.

22. Розенберг В.Я., Бутыльский А.Н., Кузник Б.И. Возрастная динамика показателей гемограммы и иммунного статуса у детей различного возраста. Медицинская иммунология. 2011. 13(2-3). 261-266. https://doi.org/10.15789/1563-0625-2011-2-3-261-266.

23. Tosato F., Bucciol G., Pantano G., Putti M.C., Sanzari M.C., Basso G., Plebani M. Lymphocytes subsets reference values in childhood. Cytometry A. 2015. 87 (1). 81–5. DOI: https://doi.org/10.1002/cyto.a.22520.

24. Shearer WT, Rosenblatt HM, Gelman RS, Oyomopito R, Plaeger S, Stiehm ER, Wara DW, Douglas SD, Luzuriaga K, McFarland EJ, Yogev R, Rathore MH, Levy W, Graham BL, Spector SA; Pediatric AIDS Clinical Trials Group. Lymphocyte subsets in healthy children from birth through 18 years of age: the Pediatric AIDS Clinical Trials Group P1009 study. J AllergyClinImmunol. 2003. 112(5). 973-80. doi: 10.1016/j.jaci.2003.07.003.

25. De Sanctis, J.B.; Garmendia, J.V.; Hajdúch, M. Overview of Memory NK Cells in Viral Infections: Possible Role in SARS-CoV-2 Infection. Immunol. 2022. 2. 52-67. https://doi.org/10.3390/immuno2010005.

26. Duygu B, Olieslagers TI, Groeneweg M, Voorter CEM, Wieten L. HLA Class I Molecules as Immune Checkpoints for NK Cell Alloreactivity and Anti-Viral Immunity in Kidney Transplantation. FrontImmunol. 2021. 12. 680480. doi: 10.3389/fimmu.2021.680480.

27. Кузник Б.И, Максимова О.Г. Общая гематология. Гематология детского возраста. Учебное пособие. Ростов н/ Д. Феникс 2007. 573.

28. Ali R.A., Wuescher L.M., Worth R.G. Platelets: essential components of the immune system. CurrTrendsImmunol. 2015. 16. 65-78.

29. Богомягкова Е.Н., Солпов А.В., Терешков П.П., Трушина Н.П., Витковский Ю.А. Возрастные изменения содержания αβ-, γδ-т-лимфоцитов и их некоторых минорных субпопуляций у здоровых детей. Иммунология. 2021. 42(5). 526-535. DOI: 10.33029/0206-4952-2021-42-4-526-535

30. Богомягкова Е.Н., Солпов А.В., Витковский Ю.А., Терешков П.П. Cодержание коагрегатов тромбоцитов с αβ-, γδ-T-лимфоцитами и их некоторыми минорными субпопуляциями в крови у здоровых детей. Иммунология. 2022. 43(1). 78-88. DOI: 10.33029/0206-4952-2021-42-6-78-81/8