ВЛИЯНИЕ ИНТЕРЛЕЙКИНА-2 И ИНТЕРФЕРОНА-α НА ЛИМФОЦИТАРНУЮ АГРЕГАЦИЮ И ЛИМФОЦИТАРНО-ТРОМБОЦИТАРНОЕ КЛАСТЕРООБРАЗОВАНИЕ

Цель исследования: изучить прямую и опосредованную тромбоцитами межклеточную адгезию лимфоцитов, выделенных из крови, а также изучить влияние на нее интерлейкина-2 и интерферона-α.

Материалы и методы. Цельную кровь 34-х практически здоровых лиц забирали с помощью вакуумных пробирок с цитратом Na. Лимфоцитарно-тромбоцитарную взвесь выделяли на градиенте фиколлурографин. С помощью световой микроскопии определяли процент лимфоцитарно-тромбоцитарных агрегатов. Влияние цитокинов изучали добавлением человеческих рекомбинантных интерлейкина-2 и интерферона-α в цельную кровь, которую затем инкубировали в термостате при 37 °С в течение 4 часов. После инкубации подсчитывали искомые показатели по вышеописанной методике. Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью U-критерия Манна–Уитни и критерия Колмогорова (Statistica 10), достоверными отличия считали при p < 0,05.

Результаты. Обнаружено, что в общем пуле лимфоцитов помимо лимфоцитарно-тромбоцитарных агрегатов (11 ± 3,6%) присутствуют межклеточные агрегаты лимфоцитов (3 ± 3,8 на 100 клеток) и лимфоцитарно-тромбоцитарные кластеры (2 ± 0,6 на 100 клеток). Выявлено, что внесение интерлейкина-2 (IL-2) увеличивало число лимфоцитарно-тромбоцитарных агрегатов (ЛТА) в 1,8 раза (p < 0,001), а лимфоцитарно-тромбоцитарных кластеров – в 3,3 раза (p < 0,001) по сравнению с контролем. Напротив, инкубация образцов крови с интерфероном-α (INF-α) снижала количество ЛТА (в 5,5 раз versus контроль, p < 0,001) и практически устраняла способность лимфоцитов и тромбоцитов образовывать кластеры. Наличие исследуемых цитокинов в инкубируемой крови никак не повлияло на способность лимфоцитов образовывать лимфоцитарно-лимфоцитарные агрегаты.

Заключение. Выявлено, что IL-2 усиливает способность лимфоцитов и тромбоцитов образовывать кластеры, а INF-α практически ее устраняет и при этом оказывает снижающее действие на число ЛТА. По нашему мнению, интересен тот факт, что эффект этих цитокинов проявился лишь в том случае, когда лимфоциты находились в контакте с тромбоцитами.

1. Rayes J., Bourne J.H., Brill A., Watson S.P. The dual role of platelet-innate immune cell interactions in thrombo-inflammation. Res Pract Thromb Haemost. 2019. Oct 17. 4 (1). 23–35. doi: 10.1002/rth2.12266.

2. Singh A., Coulter A.R., Trainor P.J., et al. Flow cytometric evaluation of platelet-leukocyte conjugate stability over time: methodological implications of sample handling and processing. J Thromb Thrombolysis. 2021 Jan. 51 (1). 120–128. doi: 10.1007/s11239-020-02186-5.

3. Витковский Ю.А., Кузник Б.И., Солпов А.В. Влияние цитокинов на лимфоцитарно-тромбоцитарную. Медицинская иммунология. 2002. 4 (2). 135–136.

4. Витковский Ю.А., Кузник Б.И., Солпов А.В. Феномен лимфоцитарно–тромбоцитарного розеткообразования. Иммунология. 1999. 4. 35–37.

5. Витковский Ю.А. Влияние интерлейкинов 1β, 2, 10 и 16 на взаимодействие лимфоцитарнотромбоцитарных агрегатов с экстрацеллюлярным матриксом. Иммунология. 2006. 141–143.

6. Солпов А.В. Влияние цитокинов на лимфоцитарно–тромбоцитарную адгезию. Тромбоз, гемостаз, реология. 2002. 1. 34–36.

7. Солпов А.В. Тромбоцитарно-лейкоцитарная адгезия в норме и патологии [диссертация … док. мед. наук]. Чита: ФГБОУ ВО «Читинская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации. 2015.

8. Shenkman B., Brill G., Solpov A. et al. CD4+ lymphocytes require platelet for adhesion to immobilized fibronectin in flow: Role of β1 (CD29) – β2 (CD18) related integrins and non– integrin receptors. Cellular Immunology. 2006. 242 (1). 52–59.

9. Solpov A., Shenkman B., Vitkovsky Y. et al. Platelets enhance CD4+ lymphocyte adhesion to extracellular matrix under flow conditions: Role of platelet aggregation, integrins, and non– integrin receptors. Thrombosis and Haemostasis. 2006. 95. 815–821.

10. G Pol J., Caudana P., Paillet J., Piaggio E., Kroemer G. Effects of interleukin-2 in immunostimulation and immunosuppression. J Exp Med. 2020 Jan 6. 217 (1). e20191247. doi: 10.1084/jem.20191247.

11. Sowa M., Sun H., Wang T., et al. Inhibiting the P2Y12 Receptor in Megakaryocytes and Platelets Suppresses Interferon-Associated Responses. J Am Coll Cardiol Basic Trans Science. 2024 Sep. 9(9). 1126–1140. doi: 10.1016/j.jacbts.2024.05.014.

12. Hong Y., Bai M., Qi X., et al. Suppression of the IFN-α and -β Induction through Sequestering IRF7 into Viral Inclusion Bodies by Nonstructural Protein NSs in Severe Fever with Thrombocytopenia Syndrome Bunyavirus Infection. J Immunol. 2019 Feb 1. 202 (3). 841–856. doi: 10.4049/jimmunol.1800576.

13. Date I., Koya T., Sakamoto T., et al. Interferon-α-Induced Dendritic Cells Generated with Human Platelet Lysate Exhibit Elevated Antigen Presenting Ability to Cytotoxic T Lymphocytes. Vaccines. 2021. 9 (1). 10. doi: 10.3390/vaccines9010010.

14. Peshkova A.D., Saliakhutdinova S.M., Sounbuli K., et al. The differential formation and composition of leukocyte-platelet aggregates induced by various cellular stimulants. Thrombosis Research. 2024 Sep. 241. 109092. doi: 610.1016/j.thromres.2024.109092.

15. Haydinger C.D., Ashander L.M., Tan A.Ch.R., Smith J.R. Intercellular Adhesion Molecule 1: More than a Leukocyte Adhesion Molecule. Biology 2023. 12 (5). 743. doi: 10.3390/biology12050743.

16. Ivetic A., Hoskins Green H.L., Hart S.J. L-selectin: A Major Regulator of Leukocyte Adhesion, Migration and Signaling. Front. Immunol. 2019. 10. 1068. doi: 10.3389/fimmu.2019.01068

17. Salem D.A., Stetler-Stevenson M. Clinical Flow-Cytometric Testing in Chronic Lymphocytic Leukemia. Methods Mol Biol. 2019. 2032. 311-321. doi: 10.1007/978-1-4939-9650-6_17.

18. Rayes J., Bourne J.H., Brill A., et al. The dual role of platelet-innate immune cell interactions in thromboinflammation. Res Pract Thromb Haemost. 2019 Oct 17. 4 (1). 23–35. doi: 10.1002/rth2.12266.

19. Mereweather L.J., Constantinescu-Bercu A., Crawley J.T.B., et al. Platelet-Neutrophil Crosstalk in Thrombosis. Int J Mol Sci. 2023 Jan 9. 24 (2). 1266. doi: 10.3390/ijms24021266.

20. Rolling C.C., Barrett T.J., Berger J.S. Platelet-monocyte aggregates: molecular mediators of thromboinflammation. Front Cardiovasc Med. 2023 May 15. 10. 960398. doi: 10.3389/fcvm.2023.960398.

21. Huang M., Wang L., Zhang Q., et al. Interleukins in Platelet Biology: Unraveling the Complex Regulatory Network. Pharmaceuticals. 2024. 17 (1). 109. doi: 10.3390/ph17010109.

22. Rolfes V., Ribeiro L.S., Hawwari I., et al. Platelets Fuel the Inflammasome Activation of Innate Immune Cells. Cell Rep. 2020 May 12. 31 (6). 107615. doi: 10.1016/j.celrep.2020.107615.

23. Lentsch A.B., Edwards M.J., Miller F.N. Interleukin-2 induces increased platelet-endothelium interactions: a potential mechanism of toxicity. J Lab Clin Med. 1996 Jul. 128 (1). 75–82. doi: 10.1016/s00222143(96)90115-8.

24. Yamane A., Nakamura T., Suzuki H., et al. Interferon-α2b–induced thrombocytopenia is caused by inhibition of platelet production but not proliferation and endomitosis in human megakaryocytes. Blood. 2008. 112 (3): 542-550. doi: 10.1182/blood-2007-12-125906.

25. Li L., Han D-K., Lu J. Interferon-α induced severe thrombocytopenia: A case report and review of the literature. World J Gastroenterol. 2010 Mar 21. 16 (11). 1414–1417. doi: 10.3748/wjg.v16.i11.1414.