Макарчук Наталия Алексеевна, ассистент кафедры офтальмологии
672000, г. Чита, ул. Горького, 39а
assistant of the department of ophthalmology
39a Gorky Street, Chita, 672000
Хворова Анастасия Дмитриевна, врач-рентгенолог
672000, г. Чита, ул. Горького, 39а
radiologis
39a Gorky Street, Chita, 672000
Лончакова Анастасия Фёдоровна, врач-эндокринолог
672000, г. Чита, ул. Горького, 39а
endocrinologist
39a Gorky Street, Chita, 672000
Солпов Алексей Владимирович, д.м.н., профессор кафедры нормальной физиологии
672000, г. Чита, ул. Горького, 39а
MD, Ph.D. Med, professor of the department of normal physiology
39a Gorky Street, Chita, 672000
Таскина Елизавета Сергеевна, к.м.н., доцент кафедры офтальмологии
672000, г. Чита, ул. Горького, 39а
Candidate of Medical Sciences, associate professor of the department of ophthalmology
39a Gorky Street, Chita, 672000
Цель исследования: изучить прямую и опосредованную тромбоцитами межклеточную адгезию лимфоцитов, выделенных из крови, а также изучить влияние на нее интерлейкина-2 и интерферона-α.
Материалы и методы. Цельную кровь 34-х практически здоровых лиц забирали с помощью вакуумных пробирок с цитратом Na. Лимфоцитарно-тромбоцитарную взвесь выделяли на градиенте фиколлурографин. С помощью световой микроскопии определяли процент лимфоцитарно-тромбоцитарных агрегатов. Влияние цитокинов изучали добавлением человеческих рекомбинантных интерлейкина-2 и интерферона-α в цельную кровь, которую затем инкубировали в термостате при 37 °С в течение 4 часов. После инкубации подсчитывали искомые показатели по вышеописанной методике. Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью U-критерия Манна–Уитни и критерия Колмогорова (Statistica 10), достоверными отличия считали при p < 0,05.
Результаты. Обнаружено, что в общем пуле лимфоцитов помимо лимфоцитарно-тромбоцитарных агрегатов (11 ± 3,6%) присутствуют межклеточные агрегаты лимфоцитов (3 ± 3,8 на 100 клеток) и лимфоцитарно-тромбоцитарные кластеры (2 ± 0,6 на 100 клеток). Выявлено, что внесение интерлейкина-2 (IL-2) увеличивало число лимфоцитарно-тромбоцитарных агрегатов (ЛТА) в 1,8 раза (p < 0,001), а лимфоцитарно-тромбоцитарных кластеров – в 3,3 раза (p < 0,001) по сравнению с контролем. Напротив, инкубация образцов крови с интерфероном-α (INF-α) снижала количество ЛТА (в 5,5 раз versus контроль, p < 0,001) и практически устраняла способность лимфоцитов и тромбоцитов образовывать кластеры. Наличие исследуемых цитокинов в инкубируемой крови никак не повлияло на способность лимфоцитов образовывать лимфоцитарно-лимфоцитарные агрегаты.
Заключение. Выявлено, что IL-2 усиливает способность лимфоцитов и тромбоцитов образовывать кластеры, а INF-α практически ее устраняет и при этом оказывает снижающее действие на число ЛТА. По нашему мнению, интересен тот факт, что эффект этих цитокинов проявился лишь в том случае, когда лимфоциты находились в контакте с тромбоцитами.
The aim of the research was to study the direct and platelet-mediated intercellular adhesion of blood-derived lymphocytes, as well as the influence of interleukin-2 and interferon-α on it.
Materials and methods. Whole blood samples from 34 apparently healthy individuals were collected using vacuum tubes containing sodium citrate (3,8%). A suspension of lymphocytes and platelets was isolated on a Ficoll-Urografin gradient. Light microscopy was used to determine the percentage of lymphocyte-platelet aggregates. The effect of cytokines was studied by adding human recombinant interleukin-2 and interferon-α to whole blood, and incubating for 4 hours in a thermostat at 37 °C. After incubation the necessary parameters were counted using the method described above. The results were expressed as mean values and standard deviations (± SD). Statistical processing of the data was performed using the Mann-Whitney U-test and the Kolmogorov criterion (Statistica 10), with differences considered significant at p < 0.05.
Results. The study showed that in addition to lymphocyte-platelet aggregates (11 ± 3.6%), the total pool of lymphocytes also contained intercellular aggregates of lymphocytes (3 ± 3,8 per 100 cells) and lymphocyteplatelet clusters (2 ± 0,6 per 100 cells). It was found that the addition of interleukin-2 (IL-2) led to an increase in lymphocyte-platelet aggregates (LPA) and lymphocyte-platelet clusters by 1,8 times (p < 0,001) and 3,3 times (p < 0,001), respectively, compared to the control group. In contrast, incubation of blood samples with interferon-α (IFN-α) led to a decrease in the number of LPA (by 5.5 times compared to the control, p < 0,001) and almost prevented the ability of lymphocytes and platelets to form clusters. The presence of the abovementioned cytokines in the incubated blood did not affect the ability of lymphocytes to form aggregates with each other.
Сonclusion. It was found that IL-2 increases the ability of lymphocytes and platelets to form clusters, while IFN-α significantly reduces this ability and has an inhibitory effect on the ability of these cells to form LPA. In our opinion, it is important that the effects of these cytokines were manifested only upon contact of lymphocytes with platelets.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.